1716年(正徳6年)、京都・錦小路の青物問屋「枡屋」の長男として生まれた。本名・伊藤源左衛門、若冲は雅号で、相国寺の禅僧・大典顕常から授かった「大盈若冲」(大いに盈つるは冲しきが若し、『老子』第45章)に由来する。幼少期から絵を好み、独学で狩野派・宋元画を研究。23歳で家業を継いだが、商売よりも絵画に没頭し、1755年(宝暦5年)40歳で家督を弟に譲り隠居、絵画に専念する身となった。代表作『動植綵絵』全30幅は1757年(宝暦7年)から1766年(明和3年)頃にかけて約10年がかりで制作、自邸の庭に数十羽の鶏を飼って徹底観察した『群鶏図』、極彩色の絹本著色で動植物の生命力を描いた金字塔的作品となった。1758年〜1764年頃には、生家近くの相国寺に『釈迦三尊像』(3幅)を奉納、後に『動植綵絵』30幅も合わせて寄進した(現在『動植綵絵』は皇室所蔵・三の丸尚蔵館蔵、国宝指定)。晩年は天明の大火(1788年)で京都の自邸を焼失し、深草の石峰寺門前に隠棲、五百羅漢石仏の制作にも関与した。1800年(寛政12年)9月10日、85歳で没。墓所は石峰寺。